نشوء الكريّات الحمر: الإريثروبوياز

             I.      المرحلة الجينيّة و التّطوّر بعد الولادة :

1.      المرحلة الجينيّة :

أ ـ الإيريثروبوياز الحميليّة :

تخلق الخلايا الإريثروبلاستيّة الأولى في مستوى الكيس المُحي , في هيأة تشبه الخلايا الجذعيّة الذّخمة , ( أم الصّفائح ) .

أمّا المرحلة الثّانة لنشوء الكريّات الحمر عند الجنين أثناء المرحلة الحميليّة تكون بالدّرجة الأولى في مستوى الكبد مع وجود بعض الخلايا في الطّحال .

ب ـ الهيموغلوبين المضغيّة و الهيموغلوبين الحميليّة :

·         الهيموغلوبين الحميليّة: HbF α₂^A  γ₂^F   تتألّف من سلاسل غلوبين ألفا α مثل الهيموغلوبين البالغة , و سلاسل غاما γ , تختلف عن سلسلة بيتاβ للهيموغلوبين العاديّة البالغة بإختلاف بين 38 الى 39 حمض أميني .

هناك صنفين من الغاما γتختلف في مستوى الحمض الأميني 136 :^Gγ تمثّل 75%  و ^Aγ = 25%  . لها إندماج مع الأكسيجين تفوق هيموغلوبين البالغين HbA .

·         الهيموغلوبين المضغيّة : ( ₂γ ₂ε ) φ  ,4ξ , ₂ε^G₂α^A .

·         تغيّرات كمّيات الغلوبين حسب تطوّر الجنين :

·         أنزيمات الكريّات الحمراء الحميليّة :

الأنزيمات التي ترتفع :الهيكزوكيناز , الإينولاز , الفوسفوغليسيرات موتاز , الغلوكوز6 ديهيدروجيناز , الفوسفوكيناز , الغلوتاتيون ريدوكتاز .

الأنزيمات التي تنخفض : الفوسفو فروكتوكيناز .  ACH استيراز .

·         المستضدّات الكريّات الحمراء الحميليّة: فصيلة الدّم :

 تظهر مستضدّات أ ب 0 =)   (ABOبسرعة , بينما يكون ظهور A₁ عدّة أشهر بعد الولادة .

2.       تطوّر نشوء الكريّات الحمر بعد الولادة :

أ ـ موقع الإريثروبوياز بعد الولادة :

·         المكاك العظمي : الهيكل العظمي المحوري و الجهة التباعدة من النّقا ( عظم العظد ) و عظم الفخذ .

·         يظهر النّشوء للكريّات الحمر خارج المكاك العظمي في حالتين :

§         ارتفاع إنتاج إيرثروبلاستي ثانوي لأنيميا ,

§         في بعض الحالات المكتسبة لقصور مكاكي عظمي .

ب ـ إنخفاض اريثروبلاستي فيزيولوجي :

يقع ذلك في الشّهور الأولى بعد الولادة : إنخفاض في الإرثروبوياز و في الإريثروبوياتين .

ج ـ الخلايا الجذعيّة للإريثروبوياز :

                 CS        →          CFU      →    ESC          →         CFU_E

                                                               BFU_E

          II.      الدراسة البنياويّة للسّلالة الإريثروبلاستيّة :

1.      التطوّر العام للإريثروبلاست :

أ ـ التّطوّر العام للإريثروبلاست نحو الكريّة الحمراء:

·         إنخفاض في الحجم .

·         الكروماتين : تكون في البداية دقيقة و متجانسة , ثمّ تتكثّف شيأ فشيأ مع التطوّر.

·         النّكليول : يكون كبيرا في المراحل الأولى ( البروإيريثروبلاست ) ليضمحلّ تماما في نفس الوقت الذّي يوافق تكثّف ا لكروماتين ... يوافق ذلك إنخفاض في توليد الحامض النّووي.

·         خروج النّواة : تنزوي النّواة في برزة سيتوبلاسميّة تتضيّق في قاعدتها , يتمّ اطلاق النواة في بضع دقائق , يتمّ إبتلاع النّواة المطلقة مع قليل من السيتوبلاسم من قبل الخلايا البالعة  الماكروفاجيّة .

ب ـ تطوّر السّيتوبلاسم :

·         الريبوزومات : كثيرة العدد في المرحلة الأولى و الهي التي تعطي الطبيعة القلويّة للتّلوّن أزرق بالماي غرينوالد جيامسا , و إنّ  كثرتها يعكس عن نشاط توليد مكثّف. تتكتّل الريبوزومات لتكوّن مركّب البولي ريبوزوم .

·         الشبكة داخل الخليّة : تكون نشيطة .

·         الميتوكوندريات : تكون أكثر أهمّيّة في المراحل الفتيّة , تتدخّل في نشوء الهيم .

·         وجود ألة غولجي و الأنابيب .

·         الحديد : في حالة فرّتين .

·         الهيموغلوبين : تضهر في المراحل الأخيرة و هي الّتي تتسبّب في تغيير اللّون . 

2 الوصف البنيوي الخلوي للسلالة الإريثروبلاستيّة.

البرو اريثروبلاست :20 - ‌‌‌‌‌‌5‌2µ

النواة : تمثل ثمانية أعشار الخلية , الكروماتين صافية , و جود نوكليولة واحدة أو نوكليولتين ,

السيتوبلازم : طوق عريض ‌2 µ  أزرق مع وجود قوس بلازمي ( جهة أكثر تلونا يوافق ذلك الى ألة غولجي )

في المجهر الإلكتروني : تضهر النكليول كبيرة  مع وجود ريبوزوم , متكوندري , ألة غولجي , و فريتين .

الإروثلوبلاست القلوي : 16 الى 18µ :

نواة مستديرة و كروماتين كبيّة 10 الى 20  في هيأة عصيات عجلة  . مع إنعدام النوكليول .

السيتوبلاسم : يصبح أوسع نضرا لتقلّص حجم النواة , أزرق اللون , القوس بلازمي أقل أهمّية .

المجهر الإليكتروني : إرتفاع الريبوزوم...  أما  الميتوكندري , الغولجي , و الفريتين فهي تتطوّر نحو التكثف .

الإريثروبلاست متعددة التّلون : 12µ .

السيمة الأساسية هو ضهور الالهيموغلوبين , إنخفاض تركيب البروتيينات و الحامض الريبوزي الشيء الذي يضهر هيأة تعدد التلوّن

النواة : مستديرة , كروماتين مكبّبة مكثفة .

السيتوبلازم : كبير الحجم نضرا لتضاءل حجم النواة . يأخذ لون أزرق أخضر الى وردي برتقالي . تتلون الفريتين بأزرق البروسي يطلق عليه إسم سيديروبلاست .

المجهر الإليكتروني : إنخفاض عدد الريبزوم و الميتوكوندريات , كتل فريتين (سيديروزوم).

الإريثروبلاست الحامضي : 9 الى 10 µ . (الإريثروبلاست متعددة التّلون اا )

خليّة غير قابلة للتقسيم . تأدي في آخر نضجها الى خروج النواة ,

نواة  : صغير الحجم , هيأة منقّطة , متطرّف .

السيتوبلازم: كبير الحجم , متجانس شبيه بالكريّة الحمراء الناضجة مع وجود سيديروزوم بتلوين بيرلس .

المجهر الإلكتروني : نواة كثيف جدا , متجانس , الريبوزوم و الميتوكوندري تصبح نادرة , وجود سيديروزوم ,

يصبح محيط السيتوبلازم غير منتظم الشيء الذي يدلّ على حركية الخلية .

الخليّة الشبكيّة :

السيمة : هي إريثروبلاست حامضي بدون نواة مع محيط سيتوبلازمي غير منتظم .

النواة : منعدم تماما .

السيتوبلازم : محيط غير منتظم , ريبوزم قليلة ( يرسب بالتلوين الحياتي) مع وجود بعض بقايا غولجي و ميتوكوندري.

ان الصباغة  تقتل الخلية الشبكيّة تؤدي الى تكوين شبكة كثيفة متكوّنة من مختلف العناصر الخلويّة الباقية : مادّة شبكيّة ليفيّة اعطت هيأتها إسم الخليّة .

تختلف عن الكرية الحمراء زيادة على الخصائص التى ورد ذكرها بأنّها أكبر حجما .

3 ـ الجزيرات الإريثروبلاستيّة :

توجد في المكاك العظمي . تتكوّن من خليّة ماكروفاجية مطوّقة بتاج  من الخلايا الإريثروبلاستيّة , تدفع الماكروفاج انعطافات سيتوبلاسمّة رقيقة بين الإريثروبلاست . لهذه الخليّة أدوار متعددّة هامّة :

·         ابتلاع النواة المخرجة  و الكريات الحمراء البالية .

·         تعطي الحديد في هيأة فريتين و ذلك بواسطة فعل يسمى الريو فييوسيتوز .

·         لها دور نضج و تخصيص , تنضج الخلايا في آن واحد و تتواجد الخلايا أكثر نضجا في الجهة الخارجيّة  .

4 ـ عبور الخلايا الشبكيّة في الدورة الدمويّة :

تتم بديابيداز أي بعد إحداث مد سيتوبلاسمي بين الخلايا الباطنيّة . تسهّل هذا العبور الإريتروبوياتين.

تبقى الخلايا الشبكية 24 ساعة في الدم قبل أن تتم نضجها . يوجد 1% الخلايا الشبكيّة بين عدد الكريات الحمر (2500 ال 85000 / مم³ .

        III.      معطيات كمّيّة و حركيّة حول الإريثروبلاست :

‍1 ‍‍- معطيات كمّية :

• عدد الإريثروبلاست ب ‍100 غ النسج النشوءي : ‌2.2 10¹¹ - 5.6 10¹¹ .
• النسبة المئويّة للعناصر الإريثروبلاستيّة في المكاك العظمي : 30- 40 % .
• الإريثروبلاست \ المحبّبات : 1\3.
• النسبة المئويّة للعناصر الإريثروبلاستيّة : البرو اريثروبلاست                2-3 %

    الإروثلوبلاست القلوي           16-17 %

    الإريثروبلاست متعددة التّلون   31- 35%

    الإريثروبلاست الحامضي          47 %

2 - حركية الإنتاج الإريثروبلاستيكي :

 . TH ³ تقنية الدراسة : الحديدالمعلّم 59 أو

 النتائج :

مدّة المرحلة س تكون أطول .

الزمن بين آخر انقسام اريثروبلاستي و طرد النواة : 8 ساعات .

مدّة الطرد :ساعة.

مدّة تحطيم النواة : ساعة .

ينخفض مؤشّر التعليم مع الفصيلة ليصبح منعدما تماما للخلايا الشبكيّة التي لا تتقسّم .

3 – نموذج نشوء الكريّات الحمر :

         المكاك العظمي        ( خليّة واحدة← ‍ 16  خليّة )                                            الدورة الدمويّة

                إنقسام و نضج                                                                                                     نضج                           

ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ   ــــــــــــــــــــــــ├    

البرو اريثروبلاست ├                                                             

                         الإروثلوبلاست القلوي ا├

                                                   الإروثلوبلاست القلوي اا├                                     الإريثروبلاست الحامضي← الخلايا الشبكيّة

                                                                                 الإريثروبلاست متعددة التّلون├

                                                                                                                      الإريثروبلاست الحامضي ← الخلايا الشبكيّة

خمسة أطوار , أربعة إنقسامات تؤدي الى 16 خليّة شبكيّة تخرج الى الدوة الدمويّة إنطلاقا من برو اريثروبلاست واحد .

  

      IV.      نشوء الهيموغلوبين :

1-      الجينات و الكروموزومات :

مختلف الهيموغلوبينات عند الإنسان :

·         هناك تشابه في البنية ناتج عن تنوّن الجين البداءي .

·         تتكون الهيموغلوبين من 4 أحاديات تتكوّن كلّ واحدة منها من سلسة بوليببتيديّة و من هيم .

·         تتكون كلّ هيموغلوبين من سلسلتين ألفا α و من سلسلتين غير α .

·         HbF = α2 γ2   HbA= α2β2   HbA2= α2 δ2 

·         نشوء كل واحدة من هذه السلاسل يكون تحت تأثير جين .

·         موقع الجين المتسببّب في نشوء السلسلة α يوجد بمفرده فوق الكروموزوم 16 . بينما توجد الجينات الأخرى المتسبّبة في نشوء السلاسل βγδ فوق الكروموزوم  11 مع تلاحم الجينات βγ .

دراسة جينات الهيموغلوببين :

·         يتكوّن الحامض النووي من متتابعات كثيرة التّردد و أخرى متوسطة التردد و بجينات ترمّز للبروتينات.

·         يوجد في الجين متتابعات رامزة  و أخرى غير  رامزة .

·         تتم دراسة الجينات بتضخيم المتتابعات و توضيحها.

الكروماتين : يشترك الحامض النووي مع البروتينات ليكون الكروماتين .

   2ـ  mRNA   الحامض النووي  الريبوزومى الرسول للهيموغلوبين :

يتكوّن من جزء مرمّز في الوسط و جزءين طرفية غير رامزة . يعتقد بأن هذا  قد يكون ناتجا عن تجزء حامض نووي ريبوزومي رسول عملاق .

 

3 ـ النشوء البيولوجي للغلوبين :

• المرحلة النووّية : تتمثل في نسخ mRNA  و خروجه من النواة.
• المرحلة السيتوبلاسميّة :

تمثل الريبوزومات موقع نشوء البروتينات حيث أنّها تعلق ب  mRNA و بالحوامض الامينيّة .

-          تعلّق ال mRNA بالريبوزومات : يعلق ال  mRNA من جهته الأمامّية . يتنقّل الريبوزوم بعد ذلك فوق ال mRNA مع شد الحوامض الأمينيّة الموافقة التي تتماسك مع بعضها لتكوين السلسة البيبتيديّة .

-          يتعلّق الحامض الأميني بالريبوزوم عن طريق الحامض النووي  الريبوزومىالناقل   tRNA  الخاص بالحمض الأميني الذي سيتم دمجه في السّلسلة البيبتيديّة .

 اطوار الدمج :

-          مرحلة تحضيريّة : تعلّق الأحادّية الرّيبوزوميّة الصّغرى بال mRNA . تليها تعلّق أوّل حامض أميني محمول بال tRNA  الموافق . يتعلّق هذا الأخير فوق الثلاثي الرامز . توثق الميثيونين الأولى و تمثّل العامل التحضيري.

-          مرحلة التطويل : وثوق الحامض الأميني- tRNA  فوق الموقع . ينقل البيبتيد من الموقع P  الى الموقع A   . ينفصل البيبتيد المزوّد بالحامض الأميني الجديد من tRNA  . تستوجب هذه المرحلة عوامل تطويل .

-          إتمام و تحرير البيبتيد . يتمّ بعد ملاقات رمز قف . يستوجب عوامل إتمام و تحرير البيبتيد .

4-  نشوء الهيم :

5 – التعديل :

هنالك تناسق في نشوء سلاسل α و β . يتم التعديل بواسطة عوامل كابحة تعمل تحت رقابة الهيم .

Hb		Globine		(Cytosol)
		Fer
Heme				Succinyl coA
↑ Heme synthetase				+
Protoporohyrine				Glycocol
↑    Protoporphyrinogene oxydase		(Mitochondrie)		Ala  synthetase  ↓
Protoporphyrinogene				ALA
↑    oxydase				Ala            ↓ dehydrase
Coproporphyrinogène III	Oxydase	Uroporphyrinogène III	Uroporphyrinogène  synthetase + Co synthetase	PBG

         V.      تعديل الإريثروبوياز دور الإريثروبوياتين  :

1 – تعريف و موقعها :

تعرّف الإريثروبوياتين بقياس نشاطها الأحيائي : فهي عامل هورموني قادر برفع حجم و العدد الجملي للكريّات الحمر عند الحيوان العادي . توجد في المصل وفي البول .

2 – الخواص الفيزوكيميائيّة :

ألفا غليكوبروتيين ,[ حامض السياليك , الهيكزوز , الهيكزوزأمين ]

القسم البروتييني يتكوّن من 17 الى 18 حامض أميني ... من بينها أربعة حوامض لازمة للفاعليّة:  التيروزين , تريبتوفان , ليزين , أرجينين .

يلعب الحامض السياليكي دور في نقل وفي حماية الهرمون .

الوزن القلوي : 70000. ثابتة في دراجات حرارّة مرتفعة . به المثلي للفعل 5 الى 9.

تفقد فعّاليتها تحت تثير أنزيمات محلّة للبروتيين . و تصمد لفعل الريبونوكلياز , اللّيزوزيم , و ألفا و بيتا أميلاز .

3 – العوامل الكابتة للإريتروبوياتين :

• بلاسما الحيوانات المتعدّدة نقل الدم اليها .
• بلاسما المواليد الجدد .
• مصل الأشخاص المصابين بفقر الدم .
• البول و البروتينات القلويّة البوليّة.
• مسحوق أنسجة .

4- الخاصّية المناعيّة :

للإريتروبوياتين خاصّية مستضدة تعطي مضادّات موجّهة ضدّ الخلايا الجذعيّة الغير الملتزمة .ECF

5 – التركيز :

·         في المخبر : فعل ECF فوق مزروعة مكاك عظمي . يلاحظ إختلاف في دمج الحديد المعلّم 59 داخل الخلايا الإريتروبلاستيّة الجنينيّة للفأرة . تكون كميّة الحديد المندمجة موازية لكميّة الإريتروبوياتين الموجودة في الوسط .

كما يمكن تقدير نسبتها بالتقنيات المناعيّة الأنزيميّة أو المناعيّة المشعّة .

·         عند الحيوان : حقن عند الفأرة ثمّ ندرس تغيّرات العناصر البيولوجيّة الدّالّة على وجود اريثروبروتايين :الهيماتوكريت , نسبة الخلايا الشبكيّة ...

فأرة تربى في وسط فقير من الأكسيجين حتى نحصل على إرتفاع في الإريثروبوياز ... نحصل على تعطّل إذا تمّ حقن الإريثروبوتايين.

·         المعايرة : يتمّ توحيد العيار بإحضار مصل عياري إبداء من رجل مصاب بالأنيميا .

·         النسب العاديّة : المرأة 0.9 ± 0.4   الرّجل 2.8 ± 1.3 أحاديّة عياريّة .

6 ـ آليّة النشاط :

• لها فعل مباشر فوق الخلايا الجذعيّة لتحوّلها الى اريثروبلاست .
• فاعليّة فوق الإريثروبلاست :
• ترفع من نشوء العناصر الخلاويّة (    RNA  DNA هيم و غلوبين
• تنشيط تكاثر  الالإريثروبلاستات القابلة للإنقسام
• تقصير وقت نضج الخلايا المنقسمة  .
•  تنشّط تحرير الخلايا الشـّبكيّة من المكاك العظمي لتلتحق بالدّورة الدمويّة .

7 –موقع و مراقبة الإنتاج :

تنتج الإريثروبوياتين خصوصا في الكلى وبصفة ثانويّة في الكبد .

يخضع تعديل الإنتاج الى رقابة فيزيوكيميائيّة : تترتفع الإريثروبوياتين في كل حالات الإختناق ( إنحلال الكريّات, إنخفاض الأكسيجين,أنيميا ) و ترتفع في حالات تكاثر نقل الدم .

↓ O2

قلب , رئتين, فوق الكلى

                                                                         كلى                                  كبد

                         REF                                                   Pro ESF

ESF      

                                                                الخلايا الجذعيّة                       بروإريثروبلاست                    كريات حمر  

8 ـ الجواب المكاكي لإرتفاع إفراز الإريثروبوياتين :

• إرتفاع عدد الإريثروبلاست مع إرتفاع سرعة نضجها .
• منتوج تفكك الهيموغلوبين يحرّر خلال إنحلال الكريّات الحمر .
• توسّع المكاك الهيماتوبوياتيكي على حساب الخلايا الأخرى .

      VI.      تعديل الإريثروبوياز دور الهرمونات الأخرى:

الهرمونات	أثر على الإريثروبوياز
الأندروجينات	+
الأستروجينات كميات كبيرة	ـ
قشري كظري الغلوككرتيكويد	+
لب الكظري	0
الثيرويد (الغدة الترقيّة)	+
الهيبوفيز (الغدة النخامية)	تعدّل
الهيبوثالاموس	±

    VII.      العوامل الخارجيّة اللاّزمة للإريثروبوياز :

1 البروتينات : يؤدي الفقر الكبير الى أنيميا,

2ـ الفيتامين ب12 :

• التركيبة : توجد في أشكال متعدّدة تحت إسم كوبالامين. متكوّنة من نوات رباعي البيروليك تشدّ ذرّة كوبالت (نواة كورّين )يكون موثوقا بدوره الى نوكليوتيد و الى عدّة تجمّعات (هيدروكسو , سيانو , ميثيل, 5’ ديسؤكسي أدينوزيل ) . الهيأة الفاعلة للكوبالامين هي كوبالامين 1 مختزلة يكون الكوبالت المركزي فيه في حالة أحادي التكافؤ. الهيأتين الوحيدتين الكوأنزيم هما : المثيل كوبالامين و ال5،ديأكسي ـ أدينوزيل ـ كوبالامين . الهيدروكسي كوبالامين و السيانوكوبالامين غائبتان في المصل العادي و لهما بالرّغم من ذلك فعل فيتامين ب12 .
• تتدخل الميثيل كوبالامين خصوصا  ككوأنزيم في تحويل العنصر الميثيل للهوموسيستاين الى ميثيونين وذلك بحضور ال ن5ـ ميثيل رباعي هيدرو ـ فولات . يمكّن تحويل مجمع ميثيل في حالة أيون كاربونيوم CH3+ , من إسترجاع الصّفيحة الدّائرة لإستقلاب الفولات : الحمض الرباعي هيدروفوليك(THF)  .  في هذا المستوى يؤدّي الفقر في الفيتامين ب 12 الى نتيجتين في منتهى الأهميّة:
• إنّ ايقاف استرجاع الميثيونين يؤدي الى اضطراب في استقلاب الحوامض الأمينيّة و الى تراكم الهوموسيستاين .
• إنّ انعدام الحمض الرباعي هيدروفوليك(THF) يعرقل استرجاع ال ن5ميثيلان ـ THF, كوأنزيم الثيميديلات سانتيتاز فيوقف بذلك تركيب ال DNA و يؤدي الى تضاخم بلاستي مكاكي الخاص بالنقص الكوبالامين .

ان الديؤكسي ـ أدينوزيل كوبالامين  لازم لتجازىء الميثيل مالونيل كو آ الى  سوكسينيل كوآ . وإنّ ايقاف هذا التفاعل [ الناتج عن فقر في الكوبالامين ] يترافق بتراكم الميثيل مالونيل كوآ  الذي يؤدّي بدوره الى يجود الحامض المانوليكي بكمّيات كبيرة في البول .

بحيث أنّ تقديرات الهوموسيستاين المصليّة و الحامض الميثيل مالونيك البولي لهما أهميّة كبيرة في التشخيص المبكّر لنقص الفيتامين ب12 زيادة على ركس هذا الأخير في الدّم .

• المصادر : تستخلص الكوبالامينات من قبل حييّات دقيقة متعدّدة . و لا تستخلص من قبل الثدييات ولا النّباتات.

عن الإنسان, يكون التركيب من قبل البكتيريات المعويّة قيل جدا . وأن المصدر الغذائي الأساسي حيواني . توجد الفيتامين ب12 في الكبد, الكلى, الحليب و السمك .

• الحاجيات : تتراوح الحاجيات اليوميّة بين 1 و 2 µغ و التي تمثل 0.1% من المخزونات النسجيّة الجسميّة . يغطي الإتيان الغذائي اليومي ( 3 الى 30µغ / اليوم) بصفة كافية هذه الحاجيات . غير أنّها ترتفع أثناء الحمل و في مراحل النمو عند المراهق.
• عبور المعوي : تلتصق الكوبالامينات الغذائيّة المحرّرة من مركّباتها البروتينية بمستقبلات صنف R و الى عامل جوهري .
• هذه المستقبلات صنف R هي غليكوبروتينات موجودة في الإفرازات المعويّة ( الريق , المرّة , العصارة البنكرياسيّة ) و تسمّى أيضا هابتوكورّين . تمثّل الهابتوكورّن 10 الى 40% من قدرة شد الفيتامين ب12 في العصارة المعديّة , كما أنّ مصاهرتها للكوبالامين في به حامض 2 يفوق 50 مرّة العامل الجوهري . وأنّ إرتفاعها في حالات مرضيّة مثل التهاب البنكرياس يؤدي الى كبح وثوق الفيتامين ب12 فوق العامل الجوهري .
• العامل الجوهري : غليكوبروتاين تركب من قبل الخلايا الجداريّة للسّرّة المعديّة , تحمي الفيتامين ب 12 من التّميء الأنزيمي ومن النّصول من قبل البكتيريات المعويّة . كما أنّها تسهّل إبتلاعه من قبل النّسج المخاطي لللّفائفي الأخير في مستوى المستقبلات الخاصّة للثنائي عامل جوهري ـ كوبالامين .
• النقل المصلي : يتم النّقل الدموي في حالة مركّبات مع الترانسكوبالامين  1 و 2 .
•  تركّب الترانسكوبالامين 1 من قبل الكريّات البيض الحبّبة ,ويمثّل إشتراكها مع الفيتامين ب12 مخزونا سيّارا .
• يبدو أنّ للترانس كوبالامين 2  دورا هاما في تقديم الفيتامين ب12 للخليّة القابلة .
• الطرح : يعاد إبتلاع معظم كمّيات الفيتامين ب12 المرشحة من قبل المرّة في مستوى المعي . فيكون بذلك طرحها قليل جدا . يمثّل مخزونها الجملي ( معظمه كبدي ) على 5مغ ... يمكّن من كفاف الجسم لمدّة سنتين الى خمس سنوات .
• الرّكس  :يتمّ الركس المخبري  بتقنيات مناعيّة مشعّة أو كيمياويّة لاصفة  . يرتكز المبدأ على تنافس بين الفيتامين ب12 للأخيذة بعد تجريدها من البروتينات الناقلة من جهة وبين فيتامين ب12 معلّمة من جهة أخرى . يتمّ التنافس على وثوق فوق مستحضر نقي للعامل الجوهري .
• الكمّيات العاديّة : 160 الى 420 بيكو مول/ل (أو 217 الى 570 ننوغرام /ل).
• يمكن ركس الكوبالامينات بتقنيّات جرثوميّة . حيث أنّ نمو البكتريا أ ـ ملهامونسيس يتعلّق مباشرة بكمّيات الكوبالامين الموجودة في الوسط . يشكل هذا النوع من الركس التقنية المرجعيّة .
• التغيّرات الفيزو مرضيّة : تشكّل الإنخفاضات في أغلب الأحيان
•  إفتقارا في الإبتلاع ( مرض بيرمار , خزع المعدة , إلتهاب معدي مقلّص ,تقليل لفائفي , تقليل إبتلاع معوي لأسباب متعدّدة , قصور بانكرياسي خارجي, موكوفيسيدوز .)
•  أو كثرة في الإستهلاك وذلك أثناء الحمل , إضطراب في التوازن الجرثومي المعوي الناجم عن أمراض متعدّدة , أو الى وجود طفيل معوي مثل البوتريوسيفال .
• بعض أسباب الفقر يكون ناتجا عن نقص في الإتيان وهو نادر . يتوجد في بعض الحالات الخاصّة( نظام أكل نباتي , لزمة إمارسلوند , فقر وراثي في العامل الجوهري أو في الترانسكوبالامين 2 ).يؤدّي النّقص الى تعطيل في تركيب الحامض الدي أكسي نوكلايك DNA . يمس جميع الخلايا ذات التّجدّد السّريع و خاصّة المكاك العظمي . يؤدي ذلك الى أنيميا ميغالوبلاستيّة تظهر بصفة متفاوتة . من الناّحية السريريّة نلاحظ إصابة عصبيّة مميّزة ناتجة عن تراكم الميثيل مالونات .

الإرتفاعات تكون ناتجة في أغلب الأحيان أثناء المعالجة بالكوبالامين ( مستحضرات متعدّدة الفيتامينات ) ,أثناء تشمّع الكبد , وفي حالات إرتفاع الترانس كوبالامين ( اللّزمات السّراطانيّة و سرطان الكبد ) .

    

3 ـ الفولات :

الفولات أو الفيتامينات ب9  , تجمع عدّة مواد ذات تركيبة كيميائيّة و فعل أحيائي متقارب .  إن ّ تواجدها بكمّيات مرتفعة في أوراق بعض النّباتات هو الذي أدى الى إعطاء الإسم المألوف الحامض الفوليكي للحامض بتيرويل غلوتاميك .

• التركيب الكيمياوي :  الحامض بتيرويل غلوتاميك هو أحادي الغلوتامات متركّب من ثلاثة جزيئات: حامض الغلوتاميك , حامض بارا أمينوبانزويك و البتارين . تنضمّ لهذه التركيبة القاعديّة عدد مختلف من جزيئات حامض الغلوتاميك التّي تكون بولي غلوتامات حامض الفوليك . هذه التركيبة هي الأكثر إنتشارا في الوسط ا لطبيعي.
• المصير في الجسم : لا يبتلع من قبل الأنبوب الهضمي  سوى الحامض الفوليكي , تتميّه البوليغلوتامات الى مونو غلوتامات وسط الأنبوب الهضمي . يختزل الحامض الفوليكي وسط الجسم مرّتين متتاليتين ليعطي الحامض رباعي هيدروفوليك ( أو الحامض تيتراهيدرو فوليك أو THF   ) . لل THF دور كبير في نقل التجمّعات الأحاديّية الكربون في تركيب القواعد البوريكيّة و البيريميديّة . كما تتدخّل الفولات في إستقلاب الحوامض الأمينيّة : تغيّر السّيرين الى غليسين و الهيستيدين الى حامض غلوتاميك , و تحويل الهوموسيستيين الى ميثيونين بحضور الفيتامين ب12 . بحيث أن كلّ فقر في الفولات و/أو في الفيتامين ب12 يترافق مع ارتفاع في الهوموسيستايين المصليّة . يمسّ هذا الفقر بالدرجة الأولى نشوء الحوامض النوويّة  الحوامض الديوكسي ريبونوكليك DNA (   .
• تتواجد الفولات بكمّيات هامة في الخضروات . تتحطم بالطّبخ  . تتراوح الحاجيات اليوميّة في حدود 100µغ . أمّا المخزونات فهي بالخصوص كبديّة و تتراوح 10µغ قادرة على تزويد الجسم لمدّة 3 أشهر .
• يتمّ التركيز بالتقنيات البكتريولوجيّة باستعمال اللّكتوباسيلوس كازيي أو بالطرق المناعيّة المشعّة أو غير المشعّة( RIA . IRMA   ) .
• تتراوح الكمّيات البلاسمّة (التي تعبّر  ب5 ميثيل رباعي هيدروفوليك)بكميّات تفوق 7.5  ننم/ل أو

3.2     µغ /ل . أمّا الكمّات داخل الكريّات الحمراء فهي 30 الى 40 مرّة أكبر , 340 الى 1600 ننم/ل

أي 150 الى 700 µغ /ل . تترجم  هذه الكمّيّات عن الصورة الحقيقيّة للمخزونات النسجيّة كما أنّها لا تتأثّر كثيرا بنقص في الإتيان الخارجي في الأيّام أو الأسابيع التي تسبق  التركيز المخبري.

·       تشاهد الإنخفاضات البلاسميّة أثناء :

o       نقص في الإتيان في أغلب الأحيان عند المسنّين (عدم تنوّع الأطعمة , طهي الخضروات ...)

o       نقص في الإبتلاع :أمراض معويّة , إسهال متواتر ...

o       إرتفاع في الحاجيات : مرأة الحامل , أنيميا محلّة مزمنة , أمراض سراطانيّة , ألتهابات حادّة .

o       تفاعلات دوائيّة : أدوية مضادّة للتّشنّج , مضادّة للفوليك ( ميثوتريكسات , ترميثوبريم ) .

o       تجتمع هذه الأسباب عند المدمنين على الكحول .

·       تنخفض الكمّيات البلاسميّة قبل الكمّيات الكرويّة لسبب الحياة الطويلة للكريّة الحمراء . إنّ النّتائج الدّمويّة للإنخفاض الفولات و الفيتامين ب12 هي نفسها : أنيميا ماكروسيتيّة ميغالوبلاستيّة مصحوبة بشذوذ في جميع السلالات الدمويّة. وأن تركيزهما ضروريا  لتشخيص الأنيميا الميغالوبلاستيّة.

4           ـ الحديد مع الكوبالت و النّحاس :

• يتواجد الحديد في حالة هيمينيّة ( هيموغلوبين , أنزيم , مييوغلوبين ) أو في حالة غير هيمينيّة ( حديد الفاريتين )
• يوجد في كثير من الأطعمة : الخضار الجافة , الغلال الجافة ...
• يبتلع في مستوى العفج ( الدودينوم) و في الجهة العليا من اللفائقي (الإيلايون) , يسهّل بحامض الكلولوريد و الحامض الأسكوربيكي .
• إنّ عمليّة الإبتلاع  هي عمليّة إيجابيّة تتطلّب  ناقلات : تنشط الإريثروبوياتين هذه العلاقة.
• الإتيان 10 مع/24س , الحاجيات : 1مغ  ترتفع عند الحامل و أثناء النمو .
• يتم النّقل في هيأة حديد الترانسفارين . كميّة الحديد الدمويّة 100µغ / 100مل . القدرة الجملّية لشد 300 ـ 350 µغ/ 100مل.
• الّقل الى الخلايا الحمر الغير الناضجة : يقع شد الترانسفارين ـ حديد فوق الإريثروبلاست بسرعة (حيث أنّ عدد المستقبلات متوافر 50000) . يرتفع هذا النّقل مع الكميّات الترانسفارين . يقع الوضع الحديد المنقول بجملته . يرتفع قدرة شد الحديد بقدر فتاوة الخلايا . يتطلّب الشد كمّات من الطاقة غير متعلّقة بتركيب الهيموغلوبين .
• تحرير في السيتوبلاسم , نقل داخل  الخليّة , إدماج في الهيم . يخزن الفائض في هيأة فاريتين .
• يمكن إعادة إستعمال الحديد المحرّر من قبل الكريّات الحمر المنحلّة.
• يكون  المخزون في هيأة فاريتين و هيموسيدارين .
• الخسائر : 1مغ /24س : بولي , هضمي و جلدي .

 VIII.      الفحص :

يرتكز بالدرجة الأولى على المعطيات الخلويّة :

1 ـ ارتفاع الخلايا الشبكيّة :

تؤخذ بالنّسبة للعدد الجملي للكريّات الكمر /مم3.

تدلّ الإرتفاعات على جواب طبيعي للمكاك العظمي . علامة تجدّد . يقع خروج مكثّف للخلايا الشبكيّة مع تطويل في مدّة الإقامة الوعائيّة أثناء الأنيميا المحلّة و الأنيميا الناّقصة للحديد. عكس ذلك , يدلّ الإنخفاض على قصور الإريثروبوياز ( أنيميا فاقيّة مركزيّة ) .

2 ـ عدد الخلايا الإريثروبلاستيّة المكاكيّة :

تشكّل هذه الخلايا ثلث العناصر المكاكيّة في الحالات العاديّة  , وأن ّ تقدير النّسبة المائويّة أثناء إرتفاع نشاط الإريثروبوياز يمكن أن يرفع عدد الخلايا الجذعيّة الحمراء حتى 80℅ ,لا يأخذ هذا الأرتفاع أهميّته إلا في عدم تحرّك السّلالات الأخرى  .

يستعمل الفحص النسجي أثناء القصور الجملي للمكاك العظمي . الإنعدام الخلوي .

3 التقنيات المشعّة :

الحديد المشع يستعمل للتشخيص , تتبع تطورات المرض و للعلاج .